高通量菌落挑选工作站的日常维护与性能校准要点

　　高通量菌落挑选工作站整合成像识别、机械定位、挑取针头、移液分装模块，用于微生物单菌落识别、自动挑取、转接培养，广泛应用于微生物筛选、基因组文库构建、环境微生物分离等批量试验。设备结构精密，光学成像、运动机构、挑取耗材状态直接影响挑取成功率与交叉污染风险，需要规范日常维护与定期性能校准，维持高通量处理能力。

　　日常维护分为班前检查、批次间隙维护、周期深度维护。班前检查优先确认光学成像系统状态，镜头、照明窗口表面洁净，无培养基喷溅、冷凝水渍，照明光源输出稳定，无明暗闪烁；检查挑取针头、耗材仓状态，耗材供给顺畅，无卡堵；运动平台空载运行，查看XYZ运动轴运行平顺，无异响、卡顿，限位触发正常；确认废液、废耗材收集容器余量充足，避免实验中途溢出。

　　批次间隙维护是控制交叉污染的关键。每轮挑取批次结束后，清理挑取通道、接种区域溅出的培养基残液，擦拭工作台面；检查针头丢弃机构，确认使用过的针头正常脱落，无挂针残留，残留针头会带来不同菌落之间交叉携带；维护内部消毒单元，按照要求执行消杀流程，抑制残留微生物增殖。长时间连续运行时，定时检查图像识别背景板，清理菌落掉落残渣，残渣会被识别为虚假菌落，造成误挑。

　　周期性深度维护按照周期开展，重点对运动传动系统、光学系统、流体模块保养。运动导轨、丝杆清理粉尘、培养基碎屑，按需加注适配润滑介质，降低运动摩擦，保证定位精度；拆解清洁成像暗仓，去除内壁积尘，避免杂散光改变成像对比度；流体管路如果配套清洗通路，定期执行管路冲洗，防止培养基析出物堵塞；检查密封圈、气动管路有无老化漏气，气动不稳会造成挑取、点样动作失败。维护完成后记录维护项目，更换老化耗材组件。

　　性能校准是保障挑取效果的核心，校准分为定位精度校准、成像识别校准、挑取动作校准。定位校准使用标准校准板，校验机械坐标和图像坐标匹配度，修正图像坐标系和运动坐标系之间的偏移，坐标偏差会导致识别到菌落位置和针头实际落点错位，挑取落空或者挑到相邻菌落。成像校准校准光源亮度、白平衡，统一成像背景，保证菌落和背景的灰度差异稳定，避免光源衰减后微小菌落识别漏检。

　　挑取性能校准使用标准质控平板，分布已知位置、大小的模拟菌落或者质控菌株菌落，连续执行挑取流程，统计挑取成功率、误挑率，评估针头拾取、释放效果；验证单菌落分离效果，检查转接后平板是否存在混杂生长，评估是否存在carry-over交叉污染。校准后记录挑取指标，指标超出允许范围时，调整识别算法参数、针头拾取压力、接触深度，复测合格后方可投入正式实验。

　　故障闭环管理，出现挑取失败、识别紊乱、运动卡滞时暂停使用，排查问题，校准或者维修后使用质控平板验证性能。整套维护校准体系，兼顾污染防控、定位精度、成像稳定性，支撑设备稳定开展高通量菌落挑选工作站的工作。